Vlastným menom Winona Laura Horowitzová sa vo filme objavila prvýkrát už v štrnástich rokoch. O dva roky neskôr stvárnila postavu samovražednej tínedžerky Lydie Deetzovej v čiernej komédii Beetlejuice (1988) režiséra Tima Burtona. S ním spolupracovala aj na jeho ďalšom filme Nožnicovoruký Edward.
Za úlohu v snímke Vek nevinnosti dostala Zlatý glóbus za vedľajšiu ženskú rolu a zároveň išlo aj o jej prvú nomináciu na Oscara. O rok neskôr dostala ďalšiu – za rolu vo filme Malé ženy. Ani jednu však na sošku nepremenila.
V roku 2010 sa Ryder, ktorá bola niekoľko rokov partnerkou herca Johnyho Deppa, sa objavila v psychologickom trilleri Čierna labuť, zasadenom do prostredia newyorskej baletnej scény. Najnovšie hrá v hororovom televíznom seriáli Stranger Things spoločnosti Netflix a jej výkon zaujal divákov aj v seriáli Nájdi mi hrdinu.
Winona, ktorá dostala meno podľa mesta, kde sa narodila, má už aj svoju hviezdu na hollywoodskom chodníku slávy. Jej kariéru pred pár rokmi však poznačil aj škandál s kradnutím oblečenia v obchodnom dome, pri ktorom ju prichytili. Herečka skončila na polícii a jej konanie sa stalo na dlhý čas zdrojom posmeškov, ale aj paródií.